ROS檢測實驗

自由基(free radicals)，是指帶不成對電子的原子、分子、離子或原子團(tuán)。自由基的種類很多，如以氧(O)、碳(C)、氮(N)為中心的活性基團(tuán)?；钚匝踝?/span>(reactive oxygen species, ROS)是生物體內(nèi)一些氧化反應(yīng)中形成的氧自由基，常見有超氧化陰離子(O2－)，過氧化氫(H₂O₂)，過氧化自由基(ROO－)和氫氧自由基(OH－)等形式。自由基外層具有非配對電子，其化學(xué)性質(zhì)非?；顫?，它既是電子供體，又是電子受體。

活性氧是細(xì)胞線粒體氧化呼吸中產(chǎn)生的自由基活性的物質(zhì)，參與細(xì)胞多種生理和病理形成機制。檢測細(xì)胞ROS的含量，可以了解ROS在細(xì)胞一些生理和病理狀態(tài)中的變化，分析藥物效應(yīng)和相關(guān)機制。

活性氧檢測試劑盒是利用ROS熒光探針－DCFH-DA進(jìn)行活性氧檢測的試劑盒。DCFH-DA本身沒有熒光，可自由透過活細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后，可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細(xì)胞膜，從而使探針很容易被裝載到細(xì)胞內(nèi)。細(xì)胞內(nèi)的活性氧可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF。檢測DCF的熒光就可以知道細(xì)胞內(nèi)的活性氧水平。根據(jù)活細(xì)胞中紅色熒光的產(chǎn)生，可以判斷細(xì)胞ROS含量的多少和變化。