肢體缺血動物模型構(gòu)建

肢體缺血動物模型構(gòu)建是實驗平臺組成之一，該實驗由從事動物實驗專業(yè)，經(jīng)驗豐富的人員進(jìn)行操作。

肢體缺血動物模型構(gòu)建本公司實驗過程所用試劑，全部為進(jìn)口試劑，已實驗的準(zhǔn)備性。

肢體缺血動物模型是進(jìn)行缺血損傷機(jī)制、血管新生等研究的基礎(chǔ)，成功制作一種效果確切、重復(fù)性強(qiáng)的肢體缺血模型是保證實驗研究能夠順利進(jìn)行的關(guān)鍵。當(dāng)前缺血性疾病患者日漸增多，以糖尿病肢體動脈閉塞癥（DAO）、閉塞性動脈硬化癥（ASO）和血栓閉塞性脈管炎（TAO）為主的下肢缺血性疾病發(fā)病率逐年增加。國外資料顯示，70歲以上老年人群中僅動脈硬化閉塞癥患病率即可達(dá)15%~20%。而患病人群范圍可覆蓋至青壯年，其高發(fā)生率和廣泛累及率已嚴(yán)重危害著人們的身心健康和生存質(zhì)量，亟待探索其發(fā)生機(jī)制、預(yù)防措施及治療方法。建立缺血動物模型是開展缺血性疾病研究的一種有效途徑。通過對動物模型的在體研究，有助于闡明缺血性疾病的病變機(jī)制、發(fā)展過程，篩選出有特異性治療作用的藥物及方法。近年來，通過建立動物后肢缺血模型進(jìn)行血管新生、基因療法和干細(xì)胞移植等研究已成為現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的研究熱點。綜合國內(nèi)外研究資料可見，肢體缺血模型適用于急性缺血、慢性持續(xù)性缺血、肢體缺血再灌注以及缺血預(yù)處理等幾方面的研究。因此，如何根據(jù)實驗?zāi)康恼_選擇肢體缺血模型的制作方法，以及如何對該模型的缺血效果進(jìn)行評價，從而制作出效果確實可靠、穩(wěn)定性良好的肢體缺血模型顯得尤為重要。有學(xué)者根據(jù)缺血效果將缺血動物模型總結(jié)為暫時缺血和永遠(yuǎn)缺血兩大類，本研究現(xiàn)對這兩類肢體缺血模型的建立、應(yīng)用和評價作一總結(jié)，以期為該模型的相關(guān)研究應(yīng)用提供參考。

模型制作

暫時缺血模型

暫時缺血模型包括肢體缺血再灌注損傷模型以及缺血預(yù)處理模型，適用于肢體缺血再灌注損傷的防治、肢體遠(yuǎn)距缺血預(yù)處理和肢體遠(yuǎn)距缺血后適應(yīng)的研究。暫時缺血模型制作方法分為肢體環(huán)扎法和暫時阻斷動脈法兩種。肢體環(huán)扎法是外用繃帶、止血帶或橡皮筋等物質(zhì)環(huán)扎于動物單側(cè)或雙側(cè)肢體根部，一段時間后放開，以此達(dá)到暫時缺血的目的。環(huán)扎時間視研究目的而異，缺血再灌注損傷一般為4 h左右，而肢體缺血后適應(yīng)或肢體遠(yuǎn)距預(yù)處理多為5 min，并反復(fù)多次進(jìn)行。肢體環(huán)扎法具有無創(chuàng)性，對實驗動物的損傷較小。暫時阻斷動脈法通過手術(shù)分離實驗動物某側(cè)局部供血動脈，用血管夾暫時夾閉血流，3h（及以上）后撤夾恢復(fù)血流灌注，其效果比肢體環(huán)扎法可靠，但對實驗動物的損傷較大。Messina 等將兩種方法相結(jié)合使用，以加強(qiáng)肢體的急性缺血程度，其效果較單純環(huán)扎或單純夾閉血管要好。大體上看，暫時缺血模型的建立方法簡便、易行，效果能夠令人滿意，基本上可以符合實驗要求。