熒光素酶檢測

簡要描述：

熒光素酶檢測技術(shù)：通過miRNA靶標(biāo)的鑒定，從而進(jìn)行miRNA功能的深入研究。

更新時(shí)間：2023-10-30

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產(chǎn)品介紹

熒光素酶檢測實(shí)驗(yàn)原理

miRNA通過堿基配對結(jié)合到靶mRNA的3'UTR區(qū),抑制靶基因的翻譯或?qū)Π谢騧RNA的降解達(dá)到調(diào)控基因表達(dá)的目的。將靶mRNA的3'UTR區(qū)構(gòu)建至螢火蟲熒光素酶報(bào)告基因的3'端，與miRNA表達(dá)載體及海腎熒光素酶報(bào)告基因載體并轉(zhuǎn)染細(xì)胞，先后加入兩種底物熒光素，通過對熒光素酶報(bào)告基因的表達(dá)檢測確認(rèn)miRNA對靶基因的調(diào)控效果。

熒光素酶檢測技術(shù)應(yīng)用：通過miRNA靶標(biāo)的鑒定，從而進(jìn)行miRNA功能的深入研究。

實(shí)驗(yàn)問題	原因	推薦解決方法
發(fā)光檢測值過低	熒光素酶表達(dá)過低	注意調(diào)整細(xì)胞狀態(tài)、轉(zhuǎn)染條件、轉(zhuǎn)染量，提高發(fā)光值
發(fā)光檢測值過低	檢測試劑	避免反復(fù)凍融以及保存時(shí)間過長
發(fā)光檢測值過高	熒光素酶表達(dá)過高	建議通過降低轉(zhuǎn)染量或減少檢測體積等降低發(fā)光